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推荐：豚鼠血小板膜糖蛋白II b/III a(GPIIb/IIIa)ELISA试剂盒

起订量 (盒)价格

1-2￥1896 /盒

≥2￥1680 /盒

品牌：DUMABIO

产地：上海

型号：96T/48T

货号：电询

发布日期： 2024-01-11
更新日期： 2024-10-09

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产品详请

产地	上海
保存条件	2-8℃
品牌	DUMABIO
货号	电询
用途	科研与实验
检测方法	吸附测定法
保质期	6个月
适应物种	豚鼠
检测限	豚鼠
数量	1000
包装规格	96T/48T
标记物	无
样本	血清，细胞，细胞上清液、体液等
应用	科研试剂
是否进口	否

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基本原理标记方法
良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性吸附。
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟，取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室温放置30分钟后加入含5g纯化抗体的水溶液1ml，混匀并装透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时（或过夜）使之结合，然后吸出，加硼氢化钠（NaBH4）溶液（5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小时，将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液，置4℃冰箱30分钟后离心，将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中，并对之透析过夜（4℃），次日离心除去不溶物，即得到酶标抗体，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，进行测定后，冷冻干燥或低温保存。
效果测定
测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
⑴ 酶与抗体的活性常用琼脂扩散或免疫电泳法，使抗原与抗体形成沉淀线，经PBS漂洗1天，再以蒸馏水浸泡1小时，将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色，如果出现应有的颜色反应，再用生理盐水浸泡，颜色仍然不褪，表示结合物既有酶的活性，也有抗体活性。良好的结合物在显色后，琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA方法进行方阵滴定，此法不仅可以测定标记效果，还可以确定酶标抗体的使用浓度。
⑵ 结合物的定量测定一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定，然后按下列公式计算：
酶量（mg/ml）=OD403×0.42
IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62
对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量，按下列公式计算：
IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.34）×0.62
已知酶量和IgG量后，即可计算出标记抗体的摩尔（mol）比值。
HRP/IgG摩尔比值=HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4
结合物中酶总量=HRP（mg/ml）×结合物溶液量
结合物产率=结合物中酶总量/标记时加入的酶量×
用于ELISA的结合物的酶量为400(g/ml时效果一般，为500(g/ml时效果较好，达 1000(g/ml时效果。mol.比值由于结合物中含的IgG并不完全可靠，所以不能作为主要参数。一般认为mol.比值为0.7时效果一般，1.0时效果较好，1.5-2.0时。酶结合率为 7%时效果一般，为9%－10%较好，达30%以上时。
系从小牛肠粘膜和大肠杆菌中提�。啥喔鐾γ缸槌�。它们的底物种类很多，常用者为硝基苯磷酸盐，廉价无毒性。酶解产物呈黄色，可溶，吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反应系统中，37℃1分钟水解1μg磷酸苯二钠为一个单位。

一、纳米颗粒分析的特点

纳米颗粒分析是一种先进的检测技术，主要用于研究纳米尺度的物质性质和行为。其特点主要表现在以下几个方面：

1. 高灵敏度：纳米颗粒分析可以检测到极低浓度的纳米颗粒，从而实现对纳米材料的测量和分析。
2. 多样性：纳米颗粒分析可以针对不同性质的纳米颗粒进行检测，包括金属、半导体、聚合物等，从而为材料科学、医学等领域的研究提供有力支持。
3. 原位实时性：纳米颗粒分析可以在不破坏样品的情况下进行原位实时检测，从而更好地了解纳米材料在实际应用中的性能和变化。
4. 操作简便：纳米颗粒分析的实验操作相对简单，可以快速获得实验结果，为科研和生产提供便利。

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二、纳米颗粒分析的优点

1. 度高：纳米颗粒分析技术可以对纳米材料进行的测量和分析，从而为科学研究提供可靠的数据支持。
2. 适用范围广：纳米颗粒分析可以应用于不同领域的研究，如材料科学、医学、环境科学等，从而为这些领域的发展提供有力支持。
3. 实验周期短：纳米颗粒分析的实验操作相对简单，可以快速获得实验结果，缩短实验周期，提高科研效率。
4. 可重复性好：纳米颗粒分析技术具有很好的可重复性，实验结果可靠，有利于科学研究的规范化和标准化。

三、纳米颗粒分析的缺点

1. 设备成本高：纳米颗粒分析需要高精度的实验设备和仪器，导致设备成本较高，增加了研究的成本负担。
2. 数据分析复杂：由于纳米颗粒分析涉及大量的数据采集和处理，数据分析过程较为复杂，需要专业人员进行数据处理和分析。
3. 对环境和样品要求高：纳米颗粒分析需要严格的实验条件和环境控制，同时对样品的要求也比较高，对于某些特殊样品的分析可能会存在困难。
4. 技术更新快：随着科学技术的不断发展，纳米颗粒分析技术也在不断更新和完善。因此，研究人员需要不断跟进的技术进展，以便更好地应用该技术进行科学研究。

凡在本公司购买ELISA试剂盒，可提供免费待测服务，视样本数量而定出结果时间，一般一周内出检测结果！

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